La drosophile ( drosophila melanogaster ) est un insecte diptère plus communément connu sous le nom de mouche du vinaigre et que l'on rencontre sur les fruits très mûrs . Cette petite mouche , de 3 à 4 mm de longueur s'élève très facilement au laboratoire .
C'est un matériel de choix pour les expériences de génétique ; en effet , son élevage étant simple et son cycle de vie très court on obtient de nombreuses générations en un temps relativement court .De plus , on reconnait aisément du moins sur la souche dite "sauvage" les mâles des femelles .
composition nourriture drosophile
-semoule de maïs 80 à 100 g
-levure de bière (ou extrait autolythique) 80 g pour la levure fraîche, 20 g pour l'extrait
- agar-agar 16 g (gélifiant naturel le plus puissant)
- nipagine ( solution à 10 % d'hydroxy-benzoate de méthyle dans de l'éthanol à 95 % ) 40 ml
- eau distillée compléter à 1000 ml
Préparation
Dans un bécher ou même dans une casserole , délayer la semoule de maïs avec un peu d'eau froide , ajouter en agitant la levure ( ou extrait de levure ) , l'agar-agar , et la nipagine, compléter à 1 litre avec de l'eau distillée et porter à ébullition pendant 1 à 2 minutes ( attention , agiter sans arrêt pour ne pas brûler le fond du récipient ). Le milieu étant prêt , le répartir dans des flacons en verre de 250 ou de 500 ml , les porter à 120°C pendant 20 minutes ( autoclave ou autocuiseur ).Répartir ensuite ce milieu ( encore chaud , le milieu se solidifie très rapidement ) dans les récipients prévus pour l'élevage ( la hauteur de milieu devra être d'environ 2 à 3 cm , plus si les récipients sont étroits ).Ces récipients peuvent être des erlenmeyers de 200 ml , des tubes à essais de large diamètre ( ceux qui servent à la culture in vitro ) ou tout autre récipient en votre possession .Fermer ces tubes avec du coton cardé et attendre le refroidissement total avant d'introduire les drosophiles. Si les récipients utilisés sont de grande contenance ( 200 ml ou plus ) prévoir des bandelettes de papier filtre que l'on disposera à l'intérieur , les larves viendront se fixer dessus pour le passage à la pupe
Elevage d' une souche
A partir d'une souche achetée chez des fournisseurs spécialisés , sélectionner des individus mâles et femelles . Pour cela , il faut les anesthésier , afin de pouvoir les observer à la loupe binoculaire. Pour l'anesthésie , on utilise un fil électrique très fin ( fil de téléphone par exemple ) au bout duquel on place une petite boule de coton , tremper le coton dans de l'éther diéthylique , l'égoutter puis l'introduire dans le récipient contenant les drosophiles , attendre 1 à 2 minutes , quand les individus ne bougent plus dans le récipient , vider son contenu dans une boite de pétri et les observer sans tarder sous une loupe binoculaire , à l'aide d'un petit pinceau , trier les mâles des femelles( pour démarrer un élevage juste quelques individus suffisent , on peut mettre par exemple 5 à 6 mâles et une dizaine de femelles ). Toujours à l'aide du pinceau , introduire les mouches dans le récipient contenant le milieu de culture , incliner celui-ci afin d'éviter que les insectes ne se "collent" sur le milieu de culture , attendre leur réveil pour remettre le récipient en position verticale.Au bout de quelques jours , les femelles pondent leurs oeufs dans le milieu de culture et 2 à 3 jours après la ponte naissent de jeunes larves ( asticots ) qui vont se nourrir du milieu et croître rapidement; en effet au bout de quatre jours les larves devenues plus grosses s'immobilisent pour donner une pupe et quatre jours après l'apparition des pupes naissent de jeunes mouches semblables à leurs parents.
fiche faite par nico
Lun 14 Sep - 15:08